طراحی و ساخت بیوسنسور ( dna elisa) جهت شناسایی باکتری e.coli atcc 25922 با استفاده مستقیم از dna ژنومی
پایان نامه
- وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس - دانشکده علوم پزشکی
- نویسنده الهه هاشمی
- استاد راهنما مهدی فروزنده مقدم
- سال انتشار 1393
چکیده
شناسایی باکتریهای پاتوژن کلید جلوگیری از بسیاری مشکلات مربوط به سلامتی است با توجه به زمانبر بودن روشهای مرسوم محققان به دنبال روشهای سریعتر با هزینه کمتر هستند. pcr ، کشت و شمارش کلنی و متدهای مبتنی بر ایمونولوژی رایجترین روشهای شناسایی باکتریها هستند. تاکنون باکتریهای بیماریزای مختلفی بر اساس روشهای نامبرده شناسایی شدند از میان آنها باکتری ایکلای شایعترین باکتری عفونت ادراری است و شناسایی آن اهمیت زیادی دارد. هدف از این پژوهش ساخت بیوسنسوری کم هزینه و در عین حال ساده به منظور شناسایی پاتوژنها با استفاده مستقیم از dna ژنومی بدون تکثیر با روش کالریمتری میباشد. در این آزمایش از دو پروب اختصاصی، به عنوان پروب نگهدارنده (نشاندار شده با بیوتین) و پروب شناساگر (نشاندار شده با dig )، مکمل ناحیه اختصاصی از ژن 16srrna و dna ژنومی باکتری ecoli atcc25922 استفاده شد. بعد از انجام فرایند هیبریداسیون و اضافه کردن آنزیم hrp متصل به آنتی دیگ و سپس سوبسترای مخصوص به آن (abts)، جذب نوری در 405 نانومتر خوانده شد. برای تعیین حساسیت تست از رقت های dna ژنومی باکتری استفاده شده و حداقل dnaی مورد نیاز برای تشخیص ارگانیسم 40هزار سلول تعیین گردید. همچنین آزمایشهای مشابه، به منظور مقایسه، با روش pcr-elisa نیز در ادامه پژوهش انجام شد و حساسیتی در حدود چهارصد سلول برای روش pcr- elisa بدست آمد. در نهایت مشخص گردید که اگرچه روشdna-elisa، در مقایسه با pcr-elisa از حساسیت کمتری برخوردار است اما، روش ارائه شده توانایی شناسایی باکتری بدون نیاز به تکثیر dna دارد و میتواند dna ژنومی را به طور مستقیم در مدت زمان کمتری در حدود 3 ساعت شناسایی کند. در حال حاضر تلاشهایی برای بهبود حساسیت تست در حال انجام است.
منابع مشابه
کلن کردن ژنRGL2 از DNA ژنومی آرابیدوپسیس (Arabidopsis thaliana)
یکی از ژنهایی که در سنتز جیبرلین در گیاه شناخته شده و موقعیت آنها در ژنوم آرابیدپسیس مشخص شده است، RGL2 میباشد که در این بررسی کلن گردید. با استخراج DNA از آرابیدوپسیس، اکوتیپ کلمبیا و استفاده از آغازگرهای اختصاصی که بر اساس توالی ژن مورد نظر ساخته شده بودند، این ژن تکثیر شد. پلاسمید PET-32a (+)و ژن تکثیر شده با استفاده از دو آنزیم برشی خاص به نامهای Nco I و Sal I برش داده شدند. پس از اتصال ژ...
متن کاملطراحی و ساخت انواع نشانگرهای dna با استفاده از dnaهای پلاسمیدی و فاژ لامبدا
هدف: امروزه نشانگرهای dna یکی از مهمترین شاخص ها در زمینه تخمین اندازه مولکولی نمونه های dna هستند که در تمام آزمایشگاه های پزشکی و تحقیقاتی از آن استفاده می شود. اما متأسفانه در کشور ما، تاکنون این ماده ساخته نشده است و تمام نمونه های نشانگر استفاده شده در کشور، از شرکت های خارجی تهیه می گردد. هدف از انجام این تحقیق، ایجاد فناوری مناسب برای ساخت این ماده ارزشمند در سطح آزمایشگاه بود. مواد و رو...
متن کاملساخت بیوسنسور الکتروشیمیایی dna برای شناسایی ویروس human papilloma virus (hpv
چکیده ندارد.
15 صفحه اولطراحی و ساخت DNA Ladder صد جفت بازی با روش تلفیقی PCR و هضم آنزیمی
Background: Molecular DNA markers are one of the most important tools in molecular biology labs. The size of DNA molecules is determined by comparing them with known bands of markers during gel electrophoresis. There are many different protocols to produce these kinds of molecular markers. In this study we have suggested an efficient strategy to produce molecular weight markers in industrial pr...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
نوع سند: پایان نامه
وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس - دانشکده علوم پزشکی
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023